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实验技术中的“惑”与“获”

  • 作者:顾兵 ,王华 ,王汉军 编
  • 出版社: 人民衛生出版社
  • 出版時間:2013-01-01
  • 版次:1
  • 商品編號: 11179134

    頁數:429

    裝幀:平装

    開本:16開

    印次:1

    印刷時間:2013-01-01


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內容簡介

  目前,各研究单位、高校和医院对科学研究越来越重视,对SCI论文、课题及成果的要求也水涨船高,而这一切往往都依赖于一个又一个的实验。作为科研主力军的研究生们整天挣扎在实验室中,为了拿到满意的实验结果而废寝忘食。实验技术的设计和操作是一个不断探索与总结的实践过程,即使是参考书或文献中看似非常成熟的操作技术,我们都有可能怎么也得不到预期的结果。在这些实践和探索过程中的每一个细小环节的盲点都可能导致我们一筹莫展,每一个细小环节都值得我们深入地探究和总结。
在实验过程中,我们常常会碰到诸多“困惑”,在消除困惑的过程中,又必然会或多或少有一些“心得与收获”。常言道:“失败是成功之母”。实验一线的科研人员几乎个个都有失败的经历,都曾而对着一个又一个困惑……。那么,如何才能从这些困惑中寻找到“柳暗花明又一村”的解决方案,去收获成功呢?《实验技术中的“惑”与“获”》旨在将科研工作者们在实验过程中的“困惑”和“收获”汇集成册,以启示后来人,让他们在今后的科学实验中少走弯路!

目录

第一篇 核酸技术
第一章 DNA提取和鉴定技术
第一节 如何获得高产量DNA
第二节 乙醇沉淀核酸中盐的作用
第三节 核酸抽提中乙醇洗涤的作用
第四节 DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
第五节 荧光素酶双报告基因中调节目的质粒与内参质粒比例是关键
第二章 RNA提取技术
第一节 如何提高RNA提取质量
第二节 如何提高总RNA纯度和产量
第三节 RNA纯度对荧光定量RT-PCR准确性的影响
第四节 组织反复冻融易致RNA降解
第五节 谁动了我的细胞RNA
第三章 质粒提取和构建技术
第一节 质粒DNA提取实验的细节深究
第二节 质粒DNA电泳有几条带
第三节 质粒构建
第四节 灵活酶切以玩转克隆
第五节 分子克隆方法——细节决定成功
第四章 PCR技术
第一节 以V2R为例设计引物并使用BLAST验证
第二节 引物设计惑与获
第子节 引物二聚体终于消失了
第四节 PCR扩增实验污染的惨痛教训
第五节 如何减少PCR产物中的引物二聚体
第六节 昙花一现的PCR结果
第七节 如何获得完美的荧光定量PCR结果
第八节 实时荧光定量PCR中荧光定量标准曲线很重要
第九节 MicroRNA的荧光定量PCR检测之我见
第十节 残缺的芯片扫描图
第十一节 “假阳鬼子”和“拦路虎”
第十二节 PCR扩增攻略
……
第二篇 蛋白质技术
第一章 蛋白质电泳技术
第一节 讨厌的波浪线
第二节 冬天里的一把火
第三节 当头棒喝!蛋白质双向凝胶电泳聚不上焦
第四节 蛋白质双向凝胶电泳横条纹的教训
第五节 蛋白质双向凝胶电泳聚焦后胶条的白色霜状析出
第六节 蛋白质双向凝胶电泳弥散的蛋白质点
第七节 Clean up失效后的思考
第二章 Western blotting方法
第一节 Wcstcrn-blotting变成了Western-lost
第二节 高背景被“擦”掉了
第三节 “祸起萧墙”——豁然开朗
第四节 蛋白条带不给力
第五节 蛋白抗体不给力
第六节 蛋白抑制剂不给力
第七节 令人费神的磷酸化蛋白的WB检测
第八节 如何使样品间内参趋于一致
第九节 为了那比金子更贵的抗体
第十节 Western Blotting 多个环节需注意
第三章 蛋白质免疫鉴定技术
第一节 都是封闭血清惹的祸
第二节 免疫荧光实验技术之我见
第三节 免疫共沉淀实验的独门秘籍——精选“手术刀”去除免疫球蛋白条带
第四章 蛋白质纯化和蛋白质晶体技术
第一节 试剂说明书不是“金标准”
第二节 沉淀、沉淀,不要再见
第三节 拨开乌云见天日——从蛋白质微晶到晶体

第三篇 细胞技术
第一章 细胞培养的基本技术
……
第四篇 微生物与免疫技术
第五篇 动物技术
第六篇 临床检验技术
第七篇 海外实验室技术


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